de la trypanosomiase humaine Africaine et les essais ...€¦ · de diagnostic rapides. Tous les papiers filtres sont envoyés au laboratoire de référence pour des tests de haut

DiTECT-HAT-WP3, Version 1.2 datée 09-Jan-2017, Traduction Française 1/22

The EDCTP is supported under Horizon 2020, the European Union’s Framework Programme for Research and Innovation

Outils diagnostiques pour l’élimination de la trypanosomiase humaine Africaine et les essais cliniques:

WP3 Monitorage post-élimination

DiTECT-HAT-WP3 Version 1.2, datée 09-Jan-2017

Traduction Française

Sponseur: Institut de Recherche pour le Développement

Investigateur coordonnateur: Veerle LEJON

DiTECT-HAT-WP3, Version 1.2 datée 09-Jan-2017, traduction Française 2/22

Numéro de Protocole: DiTECT-HAT-WP2

Titre: Outils Diagnostiques pour l’élimination de la trypanosomiase huamine Africaine et les essais cliniques: WP3 Monitorage post-élimination

Version: Protocole Version 1.2, datée 09-Jan-2017

Version antérieure: Protocole Version 1.0, datée 28-Sep-2016 : Sur demande de l’IRB, l’assentiment pour les personnes illettrées a été enlevé. Protocole Version 1.1, datée 22-Nov-2016 : Sur demande du CE Université d’Anvers, mention d’un assentiment séparé pour mineurs pour V1.2.

Institutions partenaires: -

Institut de Recherche pour le Développement, Unite Mixte de Recherche UMR 177 – Intertryp, Campus International de Baillarguet TA A-17/G, 34398 Montpellier Cedex 5, France Lejon Veerle : [email protected] Co-investigateurs : Jamonneau Vincent : [email protected]

Institut Pierre Richet, Institut National de Santé Publique, BP. V 47 Abidjan, ou BP 1500 Bouaké, Côte d'Ivoire. Kaba Dramane: [email protected] (principal investigator for Côte d’Ivoire)

Centre International de Recherche-Développement sur l'Elevage en zone Subhumide (CIRDES), 01 BP 454 Bobo-Dioulasso 01, Burkina Faso Ilboudo Hamidou : [email protected] (principal investigator for Burkina Faso)

Programme Nationale de la Lutte contre la Trypanosomiase, Ministère de la Santé, Kinshasa, DR Congo. Lumbala Crispin : [email protected] (principal investigator for RD Congo)

Institut National de Recherche Biomédicale, Avenue de la Démocratie, Kinshasa, DR Congo Mumba Ngoyi Dieudonné : [email protected]

Institute of Tropical Medicine, Department of Biomedical Sciences, Nationalestraat 155, 2000 Antwerp, Belgium Büscher Philippe : [email protected]

University of Liverpool, Institute of Infection and Global Health, University of Liverpool, Leahurst Campus, Chester High Road, Neston, CH64 7TE, United Kingdom. Eric Fèvre: [email protected]

Histoire: Cette étude correspond au work package 3 ‘Monitorage post-élimination’ du projet “Outils Diagnostiques pour l’élimination de la trypanosomiase humaine africaine et essais cliniques » (DiTECT-HAT). Ce projet fait partie du programme EDCTP2 programme, financé par l’union Européenne, numéro de projet DRIA-2014-306-DiTECT-HAT

Sponseur: Institut de Recherche pour le Développement

Investigateur: Veerle LEJON

Département: Département de Santé

Adresse: Unite Mixte de Recherche UMR 177 – Intertryp, Campus International de Baillarguet TA A-17/G, 34398 Montpellier Cedex 5, France

Téléphone: +33 467593950

Fax: +33 467593894

Email: [email protected]

mailto:[email protected]








Index INDEX .......................................................................................................................................... 3

RAPPORT DE CONFORMITE ET DE CONFIDENTIALITE ..................................................................... 4

SYNTHESE .................................................................................................................................... 5

1. INTRODUCTION ........................................................................................................................ 6

1.1 Revue de la littérature .................................................................................................................. 6

1.2 Raisonnement ............................................................................................................................... 7

2. OBJECTIFS DE L’ETUDE .............................................................................................................. 8

3. CONCEPTION DE L’ETUDE .......................................................................................................... 9

4. MÉTHODES ............................................................................................................................. 10

4.1 Site de l’étude, Population et Stratégies de l’échantillonnage ................................................... 10

4.1.1 Site de l’étude ...................................................................................................................... 10

4.1.2 Critères d'inclusion et d'exclusion au DiTECT-HAT-WP3 ..................................................... 12

4.1.3 Taille de l'échantillon, analyse des données et calcul des coûts ......................................... 13

4.2 Procédures .................................................................................................................................. 13

4 2.1 Tests diagnostiques rapides et collecte de sang sur papiers filtres (à inclusion, mois 0).... 14

4.2.2 Tests de référence dans le laboratoire régional de référence ............................................ 15

4.2.3 Examens parasitologiques ................................................................................................... 15

4.2.5 Autres études....................................................................................................................... 16

5. QUESTIONS ETHIQUES ............................................................................................................ 16

5.1 Comité d'éthique et comité d'examen institutionnel ................................................................. 16

5.2 L'information du patient et le consentement ............................................................................. 16

5.3 Procédures et conduite de l’étude.............................................................................................. 17

6. MONITORAGE ET CONTROLE DE QUALITE ................................................................................ 18

6.1 Monitorage ................................................................................................................................. 18

6.2 Contrôle de qualité ..................................................................................................................... 18

7. ASSURANCE ............................................................................................................................ 18

8. DUREE .................................................................................................................................... 18

9. GESTION DES DONNEES ET ARCHIVAGE ................................................................................... 19

9.1 Gestion des données ................................................................................................................... 19

9.2 Archivage ..................................................................................................................................... 19

10. ASPECTS FINANCIERS ............................................................................................................ 19

11. DIFFUSION DES RESULTATS ................................................................................................... 20

12. LIMITATIONS DE L'ETUDE ET RECHERCHES FUTURES .............................................................. 20

13. ABBREVIATIONS ................................................................................................................... 20

14. RÉFÉRENCES ......................................................................................................................... 21


Rapport de conformité et de confidentialité L'information contenue dans ce protocole d'étude est privilégiée et confidentielle. En tant que telle, elle ne peut être révélée à moins qu’une permission spécifique soit donnée par écrit par l'IRD ou quand une telle révélation est exigée par les lois ou règlements fédéraux ou autres. Ces restrictions par rapport à la révélation s'appliqueront également à toute les informations futures fournies qui sont privilégiées ou confidentielles. Une fois que le protocole final a été publié et signé par les enquêteurs principaux et les signataires autorisés, il ne peut pas être officieusement changé. Les amendements de protocole ont le même statut juridique et doivent passer par les étapes obligatoires de révision et approbation avant d'être mis en application. En signant ce document, l'investigateur s’engage à effectuer l'étude conformément au protocole, aux directives d’éthique applicables comme la déclaration d’Helsinki et à se conformer aux normes scientifiques internationales aussi bien que toutes les conditions régulatrices applicables. L'investigateur mettra également tout l’effort nécessaire pour mener l'étude dans les délais indiqués. Nom: Lejon Veerle Date: Signé:

Nom: Crispin Lumbala (investigateur principal RD Congo) Date: Signé:

Nom: Kaba Dramane (investigateur principal Côte d’Ivoire) Date: Signé:

Nom: Mumba Ngoyi Dieudonné Date: Signé:

Nom: Ilboudo Hamidou (investigateur principal Burkina Faso) Date: Signé:

Nom: Büscher Philippe Date: Signé:

Nom: Fèvre Eric Date: Signé:


Synthèse Dans la dernière décennie, la prévalence de la trypanosomiase africaine humaine (THA) due à Trypanosoma brucei gambiense (Tbg), est en baisse et la THA a été visée pour l'élimination. À prévalence faible de la maladie, le contrôle de la THA est de plus en plus intégré dans les activités courantes des centres de santé périphériques. Cependant, la faible capacité des structures fixes de santé de mettre en application les activités de contrôle, le manque de couverture, l'image clinique non spécifique de la THA, et l'existence des cas asymptomatiques et les réservoirs d’animaux peut résulter à la sous-détection de la THA. Pour assurer la durabilité de la transmission zéro et pour éviter la réapparition provoquée par les réservoirs restants de Tbg, le suivi monitorage continu de la post-élimination est donc nécessaire. Les travailleurs de santé faisant les visites de maison à maison dans les foyers à prévalence THA très faible peuvent facilement collecter le sang sur le papier filtre et l'envoyer au centre régional de référence THA pour analyse. L'objectif de l'étude DiTECT-HAT-WP3 est de déterminer la performance et le coût des algorithmes diagnostiques des tests sérologiques et moléculaires à haut débit sur le sang sur le papier filtre pour le monitorage post-élimination, avec ou sans un dépistage précédent avec des tests de diagnostic rapides. Dans les villages dans de faible ou zéro foyers de prévalence en RD Congo, Côte d'Ivoire et Burkina Faso, du personnel de santé ira de maison à maison et 1) enregistre tous les habitants consentants dans un Aide Personnel Digital ; 2) prend un échantillon de sang sur le papier filtre 3) exécute 2 tests de diagnostic rapides. Tous les papiers filtres sont envoyés au laboratoire de référence pour des tests de haut débit (ELISA, trypanolysis, LAMP et PCR à temps-réel). Les sujets positifs dans au moins 1 test – les tests RDTs ou les tests de Haut débit – sont deux fois revisité pour une confirmation parasitologique. Dans chaque pays, des spécimens de sang de 6000 personnes seront examinés. La performance relative et coût global des différents algorithmes diagnostiques seront étudié. Nous mesurerons le point d'équilibre pour un algorithme de test imparfait en formulant un critère de décision pour évaluer combien de faux négatifs, mais en particulier combien de faux positifs peuvent être tolérés tout en réalisant toujours une interposition avec des coûts raisonnables. Les résultats nous permettront de proposer un algorithme de test et un seuil pour envoyer les équipes mobiles spécialisées pour arrêter la réapparition de la THA, sans donner inutilement l'alarme.


1. Introduction

1.1 Revue de la littérature La trypanosomiase africaine humaine (THA) est une maladie tropicale négligée, affectant les populations rurales en Afrique sub-Saharienne. Elle est provoquée par l'infection avec les parasites Trypanosoma brucei gambiense (Tbg) ou Tb rhodesiense, et transmise par la mouche tsétsé. Environ 97% de tous les cas sont dus à l'infection à Tbg causant une maladie mortelle chronique. Le contrôle de la THA à Tbg est basé principalement sur la détection et le traitement de cas. Par des campagnes intensives, la prévalence de la THA a brusquement diminué et un niveau historique de moins de 3000 cas a été rapporté en 2015 (L'Organisation Mondiale de la Santé 2016). L'élimination d'ici 2020 du THA à Tbg comme problème de santé publique a été visée, signifiant moins d’1 nouveau cas par 10000 dans au moins 90% de foyers, suivi de la transmission zéro d'ici 2030, (Organisation Mondiale de la santé 2013; Organisation mondiale de la Santé 2014). Le diagnostic de la HAT est habituellement basé sur une combinaison de détection active et passive de cas. La détection active de cas par les équipes mobiles a en grande partie contribué à la réduction de la prévalence de la HAT. De telles équipes mobiles sont les structures spécialisées du programme national de contrôle de la THA (PNLTHA), voyageant dans les villages à risque. La population entière est examinée pour voir la présence d’anticorps spécifiques. Les examens parasitologiques spécialisés sont grands consommateurs de main-d’œuvre et limités aux suspects sérologiques et cliniques. À faible prévalence, le coût-efficacité de la détection active de cas diminue. Les équipes mobiles deviennent moins efficaces comme elles détectent peu de cas pour les mêmes efforts et le même coût. En de telles conditions, le nombre d'équipes mobiles est réduit et la détection active de cas est de plus en plus remplacée par détection passive de cas. Dans la détection passive de cas, le dépistage pour la THA est effectué par les structures de santé fixes qui examinent les personnes qui se présentent avec les signes cliniques. Dans la dernière décennie, environ la moitié des cas de THA rapportées en RD Congo ont été trouvés par la détection passive (taux de détection passive/active 0.93) (Lumbala et autres, 2015). Bien que l’intégration du contrôle de la THA dans le système de santé périphérique soit un pas principal pour l'élimination de la THA à Tbg (Organisation Mondiale de la Santé 2014), la détection passive de cas a quelques imperfections importantes. Souvent, les centres de santé fixes dans les régions endémiques de la THA manquent d'équipement essentiel, souffrent de la faible fourniture d'approvisionnements et un bon nombre d'entre eux sont sous-utilisés (Mitashi et al. 2015). Spécifiquement à la maladie est l'image clinique non spécifique de la THA qui aboutit à une sous-détection. En particulier la première phase de la maladie peut passer relativement inaperçu au patient THA, qui visite les structures de santé seulement quand les symptômes graves ou neurologiques apparaissent. Les structures fixes de santé tendent donc à détecter principalement les patients de la THA à l'étape méningo-encéphalitic de la maladie. Par exemple, en RD Congo le taux de phase méningo-encéphalitique/phase hémato-lymphatique (P2/P1) est 3.5 pour le dépistage passif, contre 0.5 pour le dépistage actif (Lumbala et al 2015). En outre, les réservoirs d’animaux et les porteurs asymptomatiques peuvent provoquer la réapparition de la THA (Bucheton et al. 2011;Funk et al. 2013) car ils sont peu susceptibles d'être détectés par le système de dépistage passif. Ainsi la capacité faible des structures de santé fixes de mettre en application les activités de contrôle, leur faible couverture, et l'image clinique non spécifique de la THA aboutit à la sous-détection des cas de THA. Le manque de couverture de certaines régions peut également contribuer à la sous-détection. Comme l’élimination, comme définie ci-dessus (Organisation Mondiale de la Santé 2013; Organisation Mondiale de la Santé 2014) n'est pas l'éradication, un suivi post-élimination est exigé pour assurer la durabilité de la transmission zéro et pour éviter la réapparition, provoquée par les réservoirs restants de Tbg, comme observé dans le passé (Simarro et al. 2015;Van Nieuwenhove et


al. 2001). Un système parfait détecte les manifestations tôt, et évite de déclencher l'alarme inutilement (Hasker et al. 2010). Toutes les fois qu'une alarme de seuil est passée, ceci devrait déclencher la mobilisation des équipes mobiles consacrées pour le dépistage actif de la population, de ce fait contenant la transmission de la HAT rapidement et évitant la réapparition des épidémies.

1.2 Raisonnement Le dépistage à distance en utilisant du papier filtre imbibé de sang a déjà été appliqué avec succès dans la lutte contre la THA (Laveissiere et al. 1998;Hasker et al 2010) et semble pratique comme système de suivi post-élimination. Les spécimens peuvent être disposés à partir d'un échantillon de piqûre de doigt obviant au besoin de phlébotomie, les taches de sang desséché peuvent être embarquées dans des sacs avec fermeture sans chaîne froide et avec un risque minimal de bio-danger comme les virus perdent leur infectiosité (Sarkar et al. 2015). Dans les régions où on suspecte la réapparition de la THA et où la couverture utilisant les systèmes classiques de détection demeure insuffisante, le sang sec sur le papier filtre peut être facilement collecté par le personnel sanitaire non spécialiste et envoyé dans un laboratoire de référence pour le test. Les algorithmes de post-élimination de différents tests de haut débit combinant des bonnes sensibilités et spécificités ont été jusqu'ici à peine explorées. Actuellement les différents tests de haut débit sont disponibles pour la THA. Ils ont tous été adaptés pour l'usage sur le sang sec sur le papier filtre. Une plateforme de PCR en temps réel a été validée dans la phase I pour la détection de Trypanozoon (gène18S) et l'identification de Tbg (gène TgsGP) dans le sang. Ces PCRs conviennent pour les tests moléculaires de haut débit (Büscher et Deborggraeve 2015). La LAMP a été commercialisée comme kit de détection Loopamp Trypanosoma brucei (Eiken Biochemicals). Il amplifie l’ADN trypanosomal cible (élément mobile d'insertion réitérée du Trypanozoon) à une température constante. L'ADN amplifiée par LAMP est visualisé à l'aide d'un dispositif UV-LED et émet une fluorescence verte qui peut être lue par l'œil nu. La performance diagnostique de LAMP est similaire au PCR classique donc il peut remplacer ainsi le PCR pour la détection de l'ADN de Trypanozoon dans les spécimens cliniques (Mitashi et al. 2013). Le LAMP a été proposé comme alternative pour la parasitologie (Njiru 2012). L'avantage du LAMP est la possibilité d'apporter le test moléculaire au niveau de l'hôpital de référence. La trypanolyse est un test de référence pour la détection d'anticorps proposée pour la surveillance de la THA. Dans la trypanolyse, l'échantillon de test est mis en contact avec les trypanosomes sanguine vivants clonés, d'antigène variable du type LiTat 1.3 et 1.5, en présence de complément (Van Meirvenne et al. 1995). La lyse du trypanosome se produit si les épitopes extérieurs variables de la glycoprotéine (VSG) sont reconnus par les anticorps spécifiques dans l'échantillon. En raison de sa spécificité élevée, la trypanolyse peut être utilisé comme marqueur de le contact avec Tbg (Jamonneau et al. 2010). En raison des conditions logistiques et bio-sécuritaires, la trypanolyse est actuellement seulement exécuté à ITM-Anvers, CIRDES-Burkina Faso et INRB-Kinshasa. L'adaptation de la trypanolysis pour du sang sur papier filtre a facilité le stockage et l'expédition de spécimen dans des laboratoires de référence (Camara et al. 2014). Le test de trypanolyse est réalisé dans des microplaques, ainsi 94 échantillons peuvent être examinés dans un tour. La détection d'anticorps standardisée par le test ELISA permet le dépistage sensible des papiers filtre imbibés de sang. L’ELISA est un test à haut débit, et peut être appliquée aux centres régionaux de référence (Hasker et al. 2010). Bien que sensible, les tests sérologiques peuvent produire des faux positifs, en particulier dans des circonstances de faible prévalence (Jamonneau et al 2010). Par exemple, ELISA sur des spécimens de surplus du sang sur du papier filtre provenant des enquêtes démographiques et de santé a été utilisé pour estimer la prévalence de la THA en RD Congo (Mumba Ngoyi et al. 2011). Des 7769 papiers filtres examinés, 0.33% étaient ELISA positifs et ont été examinés également dans la trypanolyse et le PCR en temps réel. 3 spécimens (0.039%), venant de régions endémiques connues, étaient trypanolyse positifs (2 spécimens) ou positif en PCR en temps


réel (2 spécimens), démontrant qu'une combinaison de positivité dans différents tests augmente la spécificité. Bien que des spécimens de sang sur le papier filtre peuvent être collectés facilement par le personnel sanitaire non spécialiste, les coûts d'examiner un grand nombre de spécimens peuvent devenir élevés, selon le test ou l'algorithme de test choisi. Une présélection de spécimens moins chers et simple, qui réduit le nombre d'échantillons à examiner dans le laboratoire de référence, a le potentiel de réduire considérablement les coûts à condition que la sensibilité soit suffisamment haute. Les tests de diagnostic rapides (RDT) semblent être de bons candidats pour de tels buts. Ils peuvent être exécutés par le personnel sanitaire non spécialiste après une formation minimale, ne sont pas coûteux (≤1.5euro/test), et ne prennent pas beaucoup de temps et d'équipement. La combinaison des visites porte-à-porte par un agent de santé, pour faire les RDTs et prélever le sang sur le papier filtre pour ensuite l'analyse dans un laboratoire de référence est considérée comme une stratégie alternative pratique pour la détection passive des cas (Hasker et al. 2015). Les RDTs en forme de bandelette sont en particulier convenables car ils sont plus compacts que les tests en forme de cassette, facilitant le transport d'un grand nombre de tests (L'Organisation mondiale de la santé 2015 a). Le format RDT rHAT Sero-Strip de de Coris BioConcept (2eme génération), a été évalué en laboratoire sur 1267 spécimens archivés ayant pour résultat une sensibilité de 96% (CI95-98%) et une spécificité de 96% (CI 94-97%). Le développement d'un RDT de format bandelette par Standard Diagnostics a été suspendu. Les RDTs de format cassette classique sont individuellement emballées et sont tout à fait volumineux ayant comme conséquence une diminution de la rapidité du test. Ils empêchent le transport a cause de leur grand volume (L'Organisation mondiale de la santé 2015b). Ils ne sont pas donc considérés pour DiTECT-HAT-WP3. Cependant, un test "à multiples dispositifs" en forme de cassette a été développé par le diagnostic SD se composant de 10 cassettes en plastique étroites liées entre eux mais qui sont individuellement détachable. Comme ces tests ne sont pas individuellement emballés, le temps du test et le volume sont considérablement diminués. Comme il y a seulement une différence de taille de la cassette et de l'emballage, l'exécution du test est identique aux cassettes classiques, dans ce cas-ci le test Bioline HAT 2.0 de seconde génération. Ce test de 2eme génération consiste de 2 lignes de test se composant de surface glycoprotéine invariable 65 (ISG65) recombinant et LiTaT 1.5 VSG recombinant.

2. Objectifs de l’étude L'objectif général est :

Valider, la performance et le coût des algorithmes diagnostiques de tests sérologiques et moléculaires de haut débit avec et sans pré- dépistage avec un RDT - pour la détection précoce de la réapparition de la THA à Tbg.

Les objectifs spécifiques sont :

Déterminer la performance, la praticabilité et le coût diagnostique pour la surveillance des foyers de THA à Tbg éliminés, basé sur:

1. Tests sérologiques de haut-débit sur le sang séché sur le papier filtre. 2. Tests moléculaires de haut-débit sur le sang séché sur le papier filtre. 3. Algorithmes sérologiques et moléculaires de tests de haut-débit sur le sang séché sur le

papier filtre. 4. Algorithmes d'un test diagnostic rapide (RDT) sur le sang frais avec les tests sérologiques

et moléculaires de haut-débit sur le sang séché sur le papier-filtre.


3. Conception de l’étude C’est étude est une étude non-interventionnelle, prospective et transversale, conduite dans des villages de foyers à faible et zéro prévalence en RD Congo, Côte d’Ivoire et Burkina Faso. Dans chaque foyer, pendant une période consécutive de 6 mois (pendant année 2, tenant compte les saisons des pluies et sèches), un agent de santé dépistera activement la population des villages pour 20 jours/mois. Les habitants des villages choisis recevront des messages de santé publique au sujet de la THA. Après une formation appropriée, un agent de santé visitera les villages choisis et ira de maison à maison pour : 1) registrer tous les habitants consentants dans un Assistant Digital Personnel; 2) prendre un échantillon de sang sur papier filtre ; 3) exécuter les tests diagnostic rapides (RDT). Tous les papiers filtres sont envoyés au laboratoire de référence pour les tests de haut-débit (ELISA, trypanolyse, LAMP et –PCR en temps réel). Trois et 6 mois plus tard (si pas déjà confirmé en parasitologie à 3 mois), les sujets positifs dans au moins 1 test – les RDTs ou tests de haut-débit sur papier-filtre – sont revisités pour la confirmation parasitologique par un microscopiste ambulatoire en utilisant les tests parasitologiques les plus sensibles. Les données sur tous les coûts de ces activités seront méticuleusement collectées, et l'activité sera effectuée par les services de santé publique. Si, pendant un des examens parasitologiques des trypanosomes sont détectés, le suivi prend fin et le patient THA est transféré au PNLTHA pour le traitement. Figure 1 : Sommaire de conception de l’étude DiTECT-HAT-WP3

Cette conception d’étude a quelques limitations :

1. Nous supposons que les individus qui participent à l'étude et qui sont négatifs dans tous les différents tests (2 RDTs + 4 tests de référence) ne souffrent pas de la THA. Ils ne subiront pas l'examen parasitologique. Bien que la sensibilité des différents tests ne soit pas 100%, nous supposons que la combinaison des tests qui utilisent différents principes de détection (3 antigènes différents pour les tests sérologiques et 2 séquences cibles différents pour les tests moléculaires) avec comme conséquence une augmentation de sensibilité de près de 100%. En conséquence, nous risquons de surestimer la sensibilité des tests (les vrais patients THA qui sont négatifs dans chacun des 6 tests n'ont aucune confirmation parasitologique et n'entrent pas dans les calculs de sensibilité).

2. La sensibilité des examens parasitologiques n'est pas 100%. De vrais positifs aux tests peuvent ne donc pas être confirmés parasitologiquement. Ceci affectera négativement la spécificité estimée du test. Cependant, les positifs au test seront examinés parasitologiquement deux fois pour augmenter les chances de trouver des trypanosomes.


4. Méthodes

4.1 Site de l’étude, Population et Stratégies de l’échantillonnage

4.1.1 Site de l’étude

L'étude aura lieu en parallèle dans les foyers de faible et zéro prévalence en Côte d'Ivoire, Burkina Faso et en RD Congo. Dans chaque foyer, 6000 individus seront inclus. Les foyers de test pour chaque pays sont proposés ci-dessous mais peuvent être changés/ajoutés/supprimés si nécessaire.

Burkina Faso

Au Burkina Faso la région du sud-ouest a été choisie, en particulier "le pays Lobi" (Figure 2). C'est

une région le long du fleuve Bambassou, et un foyer historique de THA qui a été particulièrement

actif, avec toujours un bon nombre de mouches tsé-tsé. Cette zone est caractérisée par de

nombreux petits villages et est à peu près 20x30 kilomètres de taille. La population est estimée à

environ 10000 habitants. Une mission préparatoire devrait identifier les villages à considérer,

déterminer la population à examiner et caractériser les structures fixes de santé présents dans la

zone. Cette mission peut aussi bien être utilisée pour sensibiliser le personnel de santé et la

population sur les objectifs de l'étude.

Figure 2: Carte du foyer Pays Lobi, proposé pour WP3 au Burkina Faso.


Côte d’Ivoire

En Côte d'Ivoire, le foyer historique de Bouaflé (Côte d'Ivoire centrale) a été identifié (figure 3). Ce foyer a été particulièrement actif dans les années 1970-1980. Quatre villages représentant une population estimée à 10000 habitants ont été présélectionnés. Une mission préparatoire confirmera le choix ci-dessus en accord mutuel avec le personnel de santé local. La population concernée sera sensibilisée sur le projet par le personnel de santé local. Figure 3: Carte de Côte d’Ivoire (central), y inclus le foyer de Bouaflé proposé pour WP3


DR Congo

En RD Congo nous travaillerons dans le foyer de Mwana Mputu, situé à environ 200 Kms de la ville de Kinshasa, dans la zone de santé de Maluku 2, province de Kinshasa. À ce foyer onze villages ont été présélectionnés dans 4 secteurs de santé (Mampu, Bukana, Dumi Mulokayi, Nkieme). Neuf villages (Mampu, Zwa Idée, Kimbambula, Au Revoir Maluku, Bukana, Mwe, Mamfu, Dumi Mulokayi, Nta-Ntsa) ont été en particulier actifs dans le reportage de cas de HAT soit activement ou passivement jusqu'en 2008. Les 2 villages restants (Mwana Mputu, Itshuali) ont rapporté des cas jusqu'en 2012. L'estimation courante de la population dans les villages concernés est autour de 10000 habitants mais les données sur le recensement et l'épidémiologie doivent être améliorées avant l'exécution du projet. En fait, cinq villages n'apparaissent pas sur la carte ci-dessous (figure 3), et les données de GPS devront être collectées avant le début des tests. Figure 3 : Carte du foyer de Mwana Mputu, dans la zone de santé de Maluku 2, proposée pour WP3

en RD Congo.

4.1.2 Critères d'inclusion et d'exclusion au DiTECT-HAT-WP3

Les participants au DiTECT-HAT-WP3 se composeront d’individus qui sont : Critères d'inclusion :

Résidents permanents des villages choisis depuis minimum 1 an Critères d'exclusion Les individus rencontrant un des critères suivants ne seront pas inclus au DiTECT-HAT-WP3

Précédemment traité pour la THA (indépendamment du temps écoulé depuis le traitement)

Pas de consentement

< 4 ans


4.1.3 Taille de l'échantillon, analyse des données et calcul des coûts

Les estimations de la sensibilité / spécificité des tests viendront de WP2. 6000 personnes/foyer seront examinés (au total 18000). Nous étudierons l'efficacité relative et le coût global de l'application des différents algorithmes diagnostiques. En utilisant nos propres données, nous ferons ceci en utilisant une approche stochastique de simulation, considérant l’incertitude et la variabilité en coûts (c.-à-d. nous n’utiliserons pas simplement des estimations de points). En utilisant les paramètres de test de WP2, nous évaluerons les algorithmes en partie en évaluant le coût total d'un faux cas positif (qui encourra un suivi inutile) et le coût d’un vrai cas positif non diagnostiqué (des périodes additionnelles d'occurrence de la maladie ou suivi additionnel). Aussi bien que possible, des coûts seront évalués à la fois aux niveaux individuel et du système de santé (coût du traitement et de la recherche de traitement, coût du suivi par le système de santé, etc..). Nous mesurerons le point d'équilibre pour un algorithme de test imparfait en formulant un critère de décision pour évaluer combien de faux négatifs, mais en particulier combien de faux positifs peuvent être tolérés (se rappelant que c'est un scénario de pré-élimination) tout en réalisant toujours une intervention avec un fardeau de coût raisonnable. Cet élément aidera dans la décision de mise en œuvre des différents algorithmes diagnostiques. Les coûts détaillés liés à la recherche de traitement, coût des activités du service de santé, coût du personnel additionnel, coûts de transport, coût de provision de tests diagnostiques, coût de suivi seront collectés auprès des patients et du personnel sanitaire dans chaque site à l'aide d'un outil standardisé.

4.2 Procédures Un sommaire des procédures de l'étude DiTECT-HAT-WP3 est donné dans le tableau 1. Tableau 1: Sommaire des procédures de l'étude DiTECT-HAT-WP3

Temps (mois)

Action Résultat Résultats finaux

Inclusion M0

Visites porte à porte : Examiner l'éligibilité pour DiTECT-HAT-WP 3 (paragraphe 4.1.2)

Inclus dans DiTECT-HAT-WP 3 : Aller au point 1.

Non éligible : Ne sera pas examiné

1 Inclusion M0

Faire 2 RDTs et collecter le sang sur le papier-filtre à envoyer au laboratoire de référence.

1.1: Tout les RDTs sont négatifs. Prendre un rendez-vous pour la communication des résultats des tests de référence (si au moins un positif) au mois 3. Aller au point 2.

1. 2 : Un ou 2 RDTs sont positif. Faire des photos. Prendre un rendez-vous pour la confirmation parasitologique et pour la communication des résultats des tests de référence au mois 3. Aller au point 2.

2 M3 ou plus tôt

Les résultats des tests de référence sur le papier filtre sont disponibles

2.1: Tous les tests RDTs et de référence sont négatifs. Aucune autre action.

Pas de THA

2.2: Un ou plusieurs RDT ou tests de référence sont positifs. Informer l'individu. Aller immédiatement au point 3.

3 M3 ou plus Exécuter l'examen 3.1: Aucun trypanosome détecté.


tôt parasitologique Donner un rendez-vous 3 mois plus tard et aller au point 4.

3.2: Des trypanosomes détectés. Enregistrer une vidéo de la confirmation parasitologique. Exécuter la ponction lombaire et transférer l’individu au PNLTHA pour le traitement

THA présente

4 M6 ou plus tôt

Exécuter l'examen parasitologique

4.1: Aucun trypanosome détecté. Pas de THA

4.2: Des trypanosomes détectés. Des trypanosomes détectés. Enregistrer une vidéo de la confirmation parasitologique. Exécuter la ponction lombaire et transférer l’individu au PNLTHA pour le traitement

THA présente

4 2.1 Tests diagnostiques rapides et collecte de sang sur les papiers filtres (à inclusion, mois 0)

En total 700 µl de sang sera collecté des individus inclus dans le DiTECT-HAT, soit par piqûre du doigt ou par venipuncture :

25 µl pour le rHAT Sero-Strip

20 µl pour le test "à multiples dispositifs » SD Bioline HAT 2.0

100 µl pour préparer le papier filtre pour LAMP

500 µl pour préparer le papier filtre pour ELISA, trypanolyse et RT-PCR. En cas de collecte de sang capillaire, des lancettes spéciales (type Tenderlett ou semblable) seront prévus, qui causent une douleur minimale en combinaison avec les tubes de collecte de sang adaptés (type Microvette 100 et 500 ou semblable). En cas de venipuncture, des RDTs seront fait sur le sang veineux.

Tests de diagnostique rapides

Le sang est examiné dans des RDTs pour le sérodiagnostic de la HAT disponibles sur le marché, strictement selon les instructions du fabricant :

le rHAT Sero-Strip (Coris Bioconcept, Belgique) : test de 2ème génération avec une ligne simple de test se composant d'un mélange d'ISG65 recombinant produit dans des Leishmania tarentolae et LiTaT 1.5 VSG recombinant produit dans Escherichia coli.

le test "à multiples dispositifs » SD Bioline HAT 2.0 (SD Diagnostics, Corée): test de 2ème génération, emballé par 10 cassettes dans une pochette. Le nombre de cassettes requises (1/personne), est enlevée et la poche est scellée de nouveau. Quant au test de cassette classique, il a 2 lignes de tests composés de glycoprotéine de surface invariable 65 (ISG-65) recombinant et de LiTaT 1.5 VSG recombinant.

Si un de ces tests est positif, on doit prendre un rendez-vous pour l'examen parasitologique (voir 4.2.3).

Dépôt du sang su papier filtre et séchage

Les préparations suivantes sont faites pour les tests de référence qui seront réalisés dans les laboratoires de référence régionaux, et pour le contrôle de qualité :

16 gouttes séparées (30 µl) de sang héparinisé sont déposés sur un papier filtre Whatman numéro 4.

µl 10 de 5%SDS sont ajoutés au 100 µl de sang. Les 100 µl de ce mélange sont placés sur un papier filtre Whatman cat#1001.


Le papier filtre est laissé pour sécher pendant au moins 30 minutes, protégé contre la lumière du soleil, la poussière et les mouches. Il est individuellement numéroté et individuellement emballé sous enveloppe, qui est emballée ainsi que d'autres enveloppes dans un sac hermétique scellé contenant le silicagel et stocké de préférence dans un réfrigérateur ou un congélateur. Le silicagel est remplacé quand un changement de couleur se produit. Les papiers filtre sont envoyés au moins une fois par mois au laboratoire régional de référence.

4.2.2 Tests de référence dans le laboratoire régional de référence

Deux laboratoires régionaux de référence participent au projet. Le sang séché sur le papier filtre collecté en Burkina Faso ou en Côte d’Ivoire est envoyé au CIRDES à Bobo-Dioulasso, les spécimens collectés en RD Congo sont envoyés au Département de Parasitologie de l'Institut National de Recherche Biomédical (INRB) à Kinshasa. Dans ces laboratoires de référence, les procédures spécifiques de laboratoire DiTECT-HAT-WP3 suivants seront exécutées sur tous les papiers filtres, indépendamment des résultats RDT, de façon aveugle:

Tests sérologiques :

Trypanolyse : sur le sang séché sur le papier filtre Whatman nr 4. 4 confettis sont élués et examinés pour voir la présence d’anticorps en utilisant le T.b. gambiense type variable d'antigène LiTat 1.3 et LiTat 1.5.

ELISA : sur le sang séché sur le papier filtre Whatman nr 4. 2 confettis sont élués et examiné utilisant comme antigène la glycoprotéine de surface variable (VSG) natif purifié de T.b.gambiense LiTat 1.3 et LiTat 1.5, et la glycoprotéine de surface invariable 65 (ISG65)

Tests moléculaires :

LAMP : sur le sang lysé avec SDS sur Whatman cat#1001 en utilisant le kit de détection Loopamp Trypanosoma brucei (Eiken Biochemicals) avec l'incubateur LAMP (de préférence avec le lecteur en temps réel)

Le PCR en temps réel : L'ADN est extraite à partir du sang séché sur le papier filtre Whatman nr 4 suivi de PCR en temps réel détectant le gène Trypanozoon 18S et si positif, le gène Tbg TgsGP

Les résultats de laboratoire devraient arriver de nouveau à l'agent de santé ayant envoyé les papiers filtre dans un délai d’1 mois de l'arrivée des papiers filtres au laboratoire de référence. Si tous les tests de référence et RDTs sont négatifs, l'individu est considéré n’ayant pas la THA et aucune mesure supplémentaire n'est prise. Si au moins 1 test est positif (RDT ou test de référence), le participant est informé et deux examens parasitologiques doivent être exécutés avec un intervalle de 3 mois. La parasitologie s’arrête dès que des trypanosomes ont été détectés. Si après 2 examens aucun trypanosome n'est détecté, le sujet est considéré comme n’ayant pas de THA.

4.2.3 Examens parasitologiques

Si au moins 1 test est positif (RDT ou test de référence), l'individu correspondant est visité deux fois par un microscopiste mobile pour l'examen parasitologique. Le temps du premier examen parasitologique devrait avoir lieu aux plus tard 3 mois après inclusion, suivi d'un 2eme examen 3 mois plus tard (au mois 6 le plus tard), à moins que des trypanosomes aient été détectés plus tôt. Les techniques pour l'examen parasitologique sont l'examen du suc ganglionnaire (si des ganglions sont présents) et la technique de centrifugation d'échange d'mini-anion (mAECT). 4 ml de sang veineux hépariné sont pris pour exécuter le mAECT. Si les ganglions gonflés sont présents, une ponction ganglionnaire est exécutée et le suc ganglionnaire est examiné immédiatement sous le microscope. Des examens additionnels pour la démonstration des trypanosomes peuvent être considérés mais, si positif, une courte vidéo est enregistré.


La personne sera informée sur les résultats de l'examen parasitologique. Si après 2 examens parasitologiques aucun trypanosome n'a été détecté, la personne est considérée comme n’ayant pas de THA. Si des trypanosomes sont détectés, l'individu est considéré comme patient THA.

4.2.5 Autres études

Les spécimens (sang séché sur le papier filtre Whatman nr 4 et le sang traité par SDS sur le papier filtre Whatman cat#1001) seront conservés à -20°C aux laboratoires de référence jusqu'à la fin de l'étude pour le contrôle de qualité (environ 10% d'échantillons). La permission pour la conservation des spécimens après la fin de l'étude DiTECT-HAT-WP3 seront demandée sur une base individuelle (voir également les questions éthiques, section 5.2).

5. Questions éthiques

5.1 Comité d'éthique et comité d'examen institutionnel Avant l'étude DiTECT-HAT-WP3, l’autorisation sur l’éthique est demandée au comité consultatif pour la déontologie et l'éthique de l'IRD, le comité d'examen institutionnel d'IMT (IRB) et les comités d’éthique de Côte d'Ivoire, Guinée et RD Congo aussi bien que les autorités régulatrices appropriées dans chaque pays. Les approbations seront en place avant le début de l'étude, et aucun participant n’est inclus et aucune activité spécifique à l’étude n’est exécutée dans un pays avant que l’autorisation sur l’éthique du comité d’éthique correspondant soit obtenue de chaque pays. Les mêmes choses s’appliquent à tous les amendements substantiels au protocole initial : tous les amendements substantiels ou analyses additionnelles sur les spécimens collectés doivent être premièrement approuvés par les comités qui ont approuvé le protocole initial. Le protocole final de l'étude est déposé à clinicaltrials.gov.

5.2 L'information du patient et le consentement Avant n'importe quelle procédure spécifique de l'étude DiTECT-HAT-WP3, chaque participant potentiel de l'étude est informé sur les objectifs, la conduite, les avantages et risques de l'étude dans la langue locale. Avant l’inclusion dans l'étude, un consentement écrit est demandé. Pour les mineurs, l’assentiment est demandé en plus du consentement d'un représentant juridique ou d'un témoin indépendant. Un formulaire séparé d’assentiment a été préparé. Les directives sur l'éthique et le GCP (bonnes pratiques cliniques) exigent que le consentement des personnes illettrées soit confirmé par un témoin instruit indépendant, qui assiste à l'entrevue de consentement et garantit que la décision du participant a été prise dans la pleine autonomie et en l'absence de coercition. Les ICH GCP exigent, par exemple, que si quelqu'un ne peut pas lire, "un témoin impartial" soit présent pendant la discussion, signe et date personnellement l'ICF, pour certifier que le consentement a été librement donné. Par conséquent, pour les sujets illettrés, un témoin instruit indépendant assistera à la discussion de consentement comme décrit dans l'ICH GCP. Pour réduire au minimum le risque que la présence du témoin indépendant peut devenir une menace à l'intimité et à la confidentialité de personne, nous allons dans le premier temps demander à l'individu d'indiquer une personne instruite de confiance (par exemple un ami, ou un parent) qui pourrait jouer ce rôle. Au cas où quelques individus ne pourraient pas venir au centre avec un témoin instruit de confiance, nous pré-identifierons des personnes de confiance disponibles dans la communauté comme témoins (par exemple dans les associations locales, les enseignants etc.), et nous les sensibilisons sur l'importance de leur rôle en protégeant le participant et sa confidentialité. De toute façon, la présence du témoin doit être explicitement acceptée par l'individu. L'apport des comités éthiques locaux sera également envisagé pour optimiser le processus selon les circonstances locales.


L'entrevue de consentement est effectuée par un investigateur, ou par un membre qualifié d'équipe délégué par l'investigateur (selon l'article 26 de la déclaration courante d’Helsinki). Tous sont formés en GCP et de l’éthique de la recherche et averti de la supériorité de l'intérêt du patient au-dessus de l'intérêt de la recherche ; en particulier, selon l'art. 14 de la déclaration courante de Helsinki, les "médecins qui combinent la recherche médicale avec le soin médical devraient faire participer leurs patients dans la recherche seulement dans la mesure où ceci est justifié par sa valeur préventive, diagnostique ou thérapeutique potentielle et si le médecin a la bonne raison de croire que la participation à l'étude de recherches ne compromettra pas la santé des patients qui servent la recherche". Le soin est également mis dans l'entrevue de consentement pour bien expliquer la nature expérimentale de la recherche, cette participation est volontaire et la décision pour décliner la participation ou se retirer ultérieurement n'a aucune conséquence sur le soin médical reçu. Les spécimens de surplus des participants de l'étude, en particulier le sang sur le papier filtre sont stockés pour la future recherche sur les maladies tropicales. Les spécimens peuvent être utilisés pour évaluer de nouvelles hypothèses de recherches ou nouveaux marqueurs de diagnostic de la maladie, aussi dans le cadre du diagnostic différentiel du THA. À cet effet, la permission pour le stockage et l'utilisation pour la future recherche est demandée en question séparée dans le formulaire de consentement, sur laquelle les participants à l'étude DiTECT-HAT-WP3 peuvent être d’accord ou pas. Pour n'importe quelle étude en dehors des buts du projet DiTECT-HAT-WP3, avant d'exécuter des analyses additionnelles, une autorisation sera demandée auprès des instances qui ont approuvé le protocole actuel de recherche. Les investigateurs identifiés dans le présent protocole, resteront impliqués.

5.3 Procédures et conduite de l’étude L'étude sera effectuée selon les principes d’éthique de la recherche de la déclaration de Helsinki (2013 et toute autre mise à jour), sous les normes de bonnes pratiques cliniques (ICH 1996 et OMS 1995) et la bonne pratique clinique de laboratoire (OMS GCLP 2009), et conformément aux conditions légales et régulatrices du pays. L'étude respectera la Directive de la Commission Européen sur la Bonne Pratique Clinique 91/507/EEC. Les patients souffrant de la HAT, recevront, selon la phase de la maladie, le pentamidine ou le NECT ou n'importe quel autre traitement approprié, fourni par le PNLTHA. Dans tous les cas, le traitement pour la THA est gratuit. Les spécimens de sang seront collectés seulement par le personnel dévoué et qualifié. Le principal inconvénient pour les participants à l’étude DiTECT-HAT-WP3 sera la collecte de sang pour les RDTs et des tests de référence. Si le sang est collecté par la piqûre du doigt, une attention spéciale au choix de la lancette appropriée sera donnée, afin d'éviter le besoin de piqûres répétées et en causant aux doigts une douleur minimale. Si un RDT ou un test de référence est positif, 4 mls de sang veineux sont collectés, pour l'examen parasitologique. Toutes les données des patients aussi bien que les échantillons biologiques sont codées au moyen d'un numéro d'étude de participant unique, seulement connu du personnel médical. Les documents qui peuvent identifier les participants, par exemple les formulaires de consentement, certains résultats de laboratoire et les données médicaux, seront seulement accessibles au personnel approprié de l'étude et aux moniteurs, auditeurs et inspecteurs, aux termes des accords de confidentialité. Le nom du participant demeure confidentiel et ne sera pas utilisé dans les rapports écrits. Les données médicales seront seulement utilisées par le personnel médical impliqué dans l'étude. Tous les instituts de collaboration adhèrent aux directives nationales et internationales concernant la confidentialité des données. L'utilisation des données personnelles sera conforme aux directives nationales et internationales pour assurer la confidentialité des individus concernés, et respectera la Directive de Commission Européenne de la Protection de données en particulier.


6. Monitorage et Contrôle de Qualité

6.1 Monitorage Le site de l'étude doit permettre au moniteur DiTECT-HAT-WP3 ou un moniteur indiqué par le projet DiTECT-HAT-WP3 d'accéder à n'importe quels dossiers ou document source de l’étude.

6.2 Contrôle de qualité Les personnes exécutant les procédures aussi bien que les laboratoires de référence recevront une formation appropriée pour exécuter les procédures, y compris la formation en GCLP. Des SOPs (procédures d’opération standardisées) pour toutes les procédures régulières sont développées. Le contrôle de qualité pour le diagnostic de la HAT consiste à :

enregistrer les photos du résultat des RDTs.

Courtes Vidéos d'enregistrement de la présence de trypanosomes Pour le contrôle de qualité sur les analyses exécutées aux laboratoires de référence, les contrôles positifs et négatifs appropriées sont incluses dans chaque test. Au moins 10% des spécimens sont testés de nouveau avec les mêmes tests et méthodologies à l'Institut de Médecine Tropicale à Anvers. Si nécessaire, une formation supplémentaire sera organisée.

7. Assurance Tous les participants à l'étude DiTECT-HAT-WP3 sont automatiquement assurés pour le mal provoqué par participation dans des épreuves cliniques par une assurance de l'IRD (Liberty Mutual Insurance Europe Limited, contrat AARQF3-004).

8. Durée Toute la durée de l'étude DiTECT-HAT est de 4 ans (Février 2016-Janvier 2020). Le tableau 2 récapitule les durées approximatives de l'étude. Tableau 2: Durée de l’étude DiTECT-HAT-WP3

01/02/2016 31/01/2020

année 1 année 2 année 3 année 4

WP3: activités terrain

T3.1 Approbation éthique

T3.2 Logistique d’étude

T3.3 Collection papier filtre, parasitologie, cout

T3.4 Data analyse

WP5: Labo de Référence

T5.1 Logistique d’étude

T5.3 analyses WP3

WP6: Assurance de Qualité

T6.1 Développement de protocols d’étude

T6.2 SOPs

T6.3 Formation

T6.4 Contrôle de qualité

WP7: Communication

T7.1: Stratégie de communication

T7.2: Communication population à risque

T7.3: Communication scientifique

T7.4: Communication publique

T7.5: Traduction des résultats en politique


9. Gestion des données et archivage

9.1 Gestion des données Les données recueillies seront gérées par DiTECT-HAT-WP3, respectant la confidentialité des participants à l'étude (aucun nom de participant ne sera transféré au personnel qui n'est pas médicalement en charge du participant). On concevra une base de données centrale DiTECT-HAT-WP3 qui regroupe toutes les données collectées dans les différents sites de l'étude (données de terrain, laboratoire de référence). La base de données sera conforme à GCP, y compris la vérification rétrospective, l’accès contrôlé et identification des données rapportées. Un SOP consacré au travail sur cette base de données sera rédigé.

9.2 Archivage L'investigateur est responsable d'assurer un endroit sûr et approprié pour le stockage du dossier et tout autre documentation liée à étude, aussi bien que de s'assurer que seulement le personnel qui est compétent et délégué pour travailler pour l'étude a accès aux dossiers. Après le fin de l'étude, toute la documentation du DiTECT-HAT-WP3 doit être gardée selon la législation locale et clinique et doit être gardée pendant une période minimum de 5 ans après la fin de l'étude. Le dossier de l'investigateur doit à tout moment rester disponible pour des vérifications internes des comptes et/ou des inspections des autorités de normalisation, aussi à la fin du projet. Les documents relatifs aux données produites dans les laboratoires de référence seront stockés au laboratoire de référence. Une copie de ces bases de données sera stockée à l’ITM. La base de données centrale sera stockée à l’ITM et à l’IRD. Après analyse et contrôle de qualité, les spécimens de sang restants sur le papier filtre sont conservés congelés (-20°C) aux laboratoires de référence où ils ont été à l'origine analysés. L'IRD doit être informé avant la destruction des dossiers ou des spécimens.

10. Aspects Financiers Le projet DiTECT-HAT-WP3 correspond au paquet de travail 3 (WP3) du projet DiTECT-HAT complété par le paquet de travail 5 pour les laboratoires de référence, le paquet de travail 6 pour le contrôle de qualité et le paquet de travail 7 pour la communication. Ce projet fait partie du programme EDCTP2 soutenu par l'Union Européenne, le Grant numéro DRIA-2014-306-DiTECT-HAT. Le budget complet du projet, y compris d'autres activités non liées à DiTECT-HAT-WP3, est 2999006€. Le budget indiqué dans le tableau 3 est un budget approximatif, couvrant une partie des activités communes avec d'autres paquets de travail de l’ensemble du projet DiTECT-HAT (y compris des activités communes de formation et équipage), tandis que d'autres dépenses (gestion, communication) ne sont pas incluses. Il couvre toutes les activités de DiTECT-HAT-WP3 dans tous les pays impliqués pendant 4 ans. Tableau 3: budget approximatif pour DiTECT-HAT-WP3

Total (en euro)

Consommables activités terrain (RDTs, parasitologie, échantillonage) 103300

Consommables labo de référence (ELISA, trypanolyse, LAMP, RT-PCR) 259700

Equipement activités terrain (microscopes, voitures, centrifugeuses, etc) 89810

Equipement labo de référence (ELISA, LAMP, RT-PCR) 108000

Salaires & per diem 201600

training activités de formation 81500


Approbation éthique 1500

2 publications Open access 8000

participation congres international 16000

Total 869410

11. Diffusion des résultats Les résultats de l'étude seront disséminés parmi la communauté scientifique et les organismes de contrôle de la THA par l'intermédiaire des présentations, publications et recommandations comme indiqués dans le plan de communication et de diffusion du paquet de travail 7 du projet DiTECT-HAT.

12. Limitations de l'étude et recherches futures Les résultats nous permettront de proposer des algorithmes de test à moindre coûts pour établir un système de monitorage post-élimination pour la THA. Cette étude ne donnera pas de réponses sur le meilleur contrôle de la THA dans des régions sous alarme de réémergence. Une fois l’étude a démarré, aucun nouveau test sur sang frais ne pourra être ajouté. Des tests diagnostiques sur papier filtre pourront être ajouté postérieurement dans les limites de volume de spécimen restant.

13. Abbreviations CATT Test d’agglutination sur carte pour la Trypanosomiase CI 95% intervalle de confidence CIRDES Centre International pour la Recherche-Développement sur l’Elevage en zone Subhumide DR Congo Republique Democratique du Congo GCP Bonnes pratiques cliniques (Good clinical practice) GCLP Bonnes pratiques cliniques de laboratoire (Good clinical laboratory practice) THA Trypanosomiase Humaine Africaine ICH GCP International Conference on Harmonisation-Good Clinical Practice INRB Institut National de Recherche Biomédicale IRD Institut de Recherche pour le Développement ISG65 glycoprotein invariant de surface 65 IMT Institut de Médecine Tropicale LAMP Loop-mediated isothermal amplification mAECT technique d’échangeuse mini-anion centrifugation PCR Polymerase chain reaction PNLTHA Programme National de Lutte contre la trypanosomiase humaine Africaine RDT Test de diagnostic rapide (Rapid diagnostic test) RIME Trypanozoon repetitive insertion mobile element SOP procédure d’opération standardisée Tbg Trypanosoma brucei gambiense VSG glycoprotéine de surface variable WP packet de travail (Work package) WHO / OMS World Health Organization / Organisation mondiale de la santé


14. Références

1. Bucheton B, MacLeod A, & Jamonneau V (2011) Human host determinants influencing the outcome of Trypanosoma brucei gambiense infections.Parasite Immunology 33, p 438-447.

2. Büscher P & Deborggraeve S (2015) How can molecular diagnostics contribute to the elimination of human African trypanosomiasis?Expert Review of Molecular Diagnostics 15, p 607-615.

3. Camara O, Camara M, Lejon V et al. (2014) Immune trypanolysis test with blood spotted on filter paper for epidemiological surveillance of sleeping sickness.Tropical Medicine and International Health 19, p 828-831.

4. Funk S, Nishiura H, Heesterbeek H, Edmunds WJ, & Checchi F (2013) Identifying transmission cycles at the human-animal interface: the role of animal reservoirs in maintaining gambiense human african trypanosomiasis.PLoS Comput.Biol. 9, p e1002855.

5. Hasker, E., Lumbala, C., Mpanya, A., Mbo, F., Snijders, R., Meheus, F., Lutumba, P., and Boelaert, M. Alternative strategies for case finding in human African trypanosomiasis in the Democratic Republic of the Congo. Tropical Medicine and International Health 20,Supplement 1, 340. 2015.

6. Hasker E, Lutumba P, Mumba D et al. (2010) Diagnostic accuracy and feasibility of serological tests on filter paper samples for outbreak detection of T.b. gambiense human African trypanosomiasis.American Journal of Tropical Medicine and Hygiene 83, p 374-379.

7. Jamonneau V, Bucheton B, Kaboré J et al. (2010) Revisiting the immune trypanolysis test to optimise epidemiological surveillance and control of sleeping sickness in west Africa.PLoS Neglected Tropical Diseases 4, p e917-4.69.

8. Laveissiere C, Meda AH, Doua F, & Sane B (1998) [Detecting sleeping sickness: comparative efficacy of mobile teams and community health workers].Bulletin of the World Health Organization 76, p 559-564.

9. Lumbala C, Simarro PP, Cecchi G et al. (2015) Human African trypanosomiasis in the Democratic Republic of the Congo: disease distribution and risk.International Journal of Health Geographics 14, p 20.

10. Magnus E, Vervoort T, & Van Meirvenne N (1978) A card-agglutination test with stained trypanosomes (C.A.T.T.) for the serological diagnosis of T.b.gambiense trypanosomiasis.Annales de la Société Belge de Médecine Tropicale 58, p 169-176.

11. Mitashi P, Hasker E, Mbo F et al. (2015) Integration of diagnosis and treatment of sleeping sickness in primary healthcare facilities in the Democratic Republic of the Congo.Tropical Medicine and International Health 20, p 98-105.

12. Mitashi P, Hasker E, Mumba Ngoyi D et al. (2013) Diagnostic accuracy of LoopampTM Trypanosoma brucei detection kit for diagnosis of human African trypanosomiasis in clinical samples.PLoS Neglected Tropical Diseases 7, p e2504.

13. Mumba Ngoyi D, Bohorquez E, Messina J et al. (2011) Prevalence of human African trypanosomiasis in the Democratic Republic of the Congo.PLoS Neglected Tropical Diseases 5, p e1246.

14. Njiru ZK (2012) Loop-mediated isothermal amplification technology: towards point of care diagnostics.PLoS Neglected Tropical Diseases 6, p e1572.

15. Sarkar S, Singh MP, & Ratho RK (2015) Dried blood spot for Ebola testing in developing countries.Lancet Infect.Dis. 15, p 1005.

16. Simarro PP, Cecchi G, Franco JR et al. (2015) Monitoring the progress towards the elimination of gambiense human African trypanosomiasis.PLoS Negl.Trop.Dis. 9, p e0003785.

17. Van Meirvenne N, Magnus E, & Büscher P (1995) Evaluation of variant specific trypanolysis tests for serodiagnosis of human infections with Trypanosoma brucei gambiense.Acta Tropica 60, p 189-199.


18. Van Nieuwenhove S, Kande Betu-Ku-Mesu V, Mansinsa Diabakana P, Declercq J, & Miaka Mia Bilenge C (2001) Sleeping sickness resurgence in the DRC: the past decade.Tropical Medicine and International Health 6, p 335-341.

19. World Health Organization. Report of a WHO meeting on elimination of African trypanosomiasis (Trypanosoma brucei gambiense), 3-5 December 2012, Geneva, Switzerland. World Health Organization. 1-80. 2013. Geneva, http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/79689/1/WHO_HTM_NTD_IDM_2013.4_eng.pdf.

20. World Health Organization. Report of the first WHO stakeholder meeting on gambiense human African trypanosomiasis elimination, Geneva 25-27 March 2014. 1-54. Geneva, http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/147021/1/9789241508070_eng.pdf?ua=1.

21. World Health Organization. Report of the second meeting of the sub-group "Integration of new tools into national and global policies". HAT diagnostics . World Health Organization. 1-42. Geneva, WHO network for HAT elimination.

22. World Health Organization. Report of the second meeting of the sub-group "Integration of new tools into national and global policies". HAT diagnostics . World Health Organization. 1-42. Geneva, WHO network for HAT elimination.

23. World Health Organization. Lowest caseload recorded as the world prepares to defeat sleeping sickness. 2016. http://www.who.int/neglected_diseases/news/HAT_lowest_caseload_recorded/en/.

http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/79689/1/WHO_HTM_NTD_IDM_2013.4_eng.pdf

http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/147021/1/9789241508070_eng.pdf?ua=1

http://www.who.int/neglected_diseases/news/HAT_lowest_caseload_recorded/en/

Documents

de la trypanosomiase humaine Africaine et les essais ...€¦ · de diagnostic rapides. Tous les papiers filtres sont envoyés au laboratoire de référence pour des tests de haut