8
Naresuan University Journal 2007; 15(3): 187-194 187 ¤ÇÒÁᵡµÒ§ã¹¡ÒÃÊÃÒ§à͹ä«Á b-Lactamase ¢Í§àª×éÍ Burkholderia pseudomallei ¾ÃóÃÒ ÀÔºÒÅÀÑ¡´Õ a, * ¾Ãó¹Ô¡Ò ĵÇÔÃØÌË a áÅÐ ÊØÃÈÑ¡´Ôì ǧÈÃѵ¹ªÕÇÔ¹ b,c Differences in b-Lactamase Induction among Burkholderia pseudomallei Phannarai Pibalpakdee a, * , Pannika Ritvirool a and Surasakdi Wongratanacheewin b,c a ÀÒ¤ÇÔªÒ¨ØŪÕÇÇÔ·ÂÒáÅлÃÊÔµÇÔ·ÂÒ ¤³ÐÇÔ·ÂÒÈÒʵáÒÃá¾·Â ÁËÒÇÔ·ÂÒÅѹàÃÈÇà Í.àÁ×ͧ ¨.¾ÔɳØâÅ¡ 65000 b ÀÒ¤ÇÔªÒ¨ØŪÕÇÇÔ·ÂÒ ¤³Ðá¾·ÂÈÒʵà ÁËÒÇÔ·ÂÒÅÑ¢͹᡹ Í.àÁ×ͧ ¨.¢Í¹á¡¹ 40002 c ÈÙ¹ÂÇÔ¨ÑÂâäàÁÅÔÍÍÂâ´ÊÔÊ ¤³Ðá¾·ÂÈÒʵà ÁËÒÇÔ·ÂÒÅÑ¢͹᡹ Í.àÁ×ͧ ¨.¢Í¹á¡¹ 40002 a Department of Microbiology and Parasitology, Faculty of Medical Science, Naresuan University, Phitsanulok 65000, Thailand. b Department of Microbiology, Faculty of Medicine, Khon Kaen University, Khon Kaen 40002, Thailand. c Melioidosis Research Center, Faculty of Medicine, Khon Kaen University, Khon Kaen 40002, Thailand. *Corresponding author. E-mail address: [email protected] (P. Pibalpakdee) Received 30 April 2007; accepted 19 November 2007 The results of this paper were presented in part at The Third Naresuan University Research Conference, Phitsanulok, Thailand during 28-29 September 2007 º·¤Ñ´ÂÍ àª×éÍ Burkholderia pseudomallei ໹àª×éÍẤ·ÕàÃÕÂÊÒà˵آͧâäàÁÅÔÍÍÂâ´ÊÔÊ·Õ辺ÁÒ¡ã¹àÍàªÕµÐÇѹÍÍ¡à©Õ§㵠â´Â੾ÒлÃÐà·Èä·Â áÅзҧµÍ¹à˹×ͧ͢»ÃÐà·ÈÍÍÊàµÃàÅÕ ¨Ò¡¡ÒÃÈÖ¡ÉÒ¤ÇÒÁËÅÒ¡ËÅÒ¢ͧàª×éÍ B. pseudomallei ¨Ó¹Ç¹ 16 äÍâ«àŵ á¡䴨ҡ¼Ù»Ç¨ӹǹ 8 ÃÒÂã¹âç¾ÂÒºÒÅÈÃÕ¹¤ÃÔ¹·Ã ¨Ñ§ËÇÑ´¢Í¹á¡¹´ÇÂà·¤¹Ô¤ pulsed field gel electrophoresis (PFGE) ¾ºÇÒÁÕ¤ÇÒÁËÅÒ¡ËÅÒ¢ͧÅѡɳзҧ¾Ñ¹¸Ø¡ÃÃÁ¢Í§àª×éÍ·Õèá¡䴨ҡ¼Ù»Ç áÅÐÁÕ¡ÒõԴàª×éÍẺ multiple infection 㹼ٻǨӹǹ 2 ÃÒ àÁ×èÍ·´Êͺ¤ÇÒÁäǵÍÂÒ»¯ÔªÕǹТͧàª×éÍ´ÇÂÇÔ¸Õ disk diffusion test áÅÐ MIC ¾ºÇÒàª×éÍÊǹãË-´×é͵ÍÂÒ cefepime áµÂѧ¤§äǵÍÂÒ ceftazidime áÅÐ imipenem «Öè§à»¹ÂÒÊÓËÃѺãªã¹¡ÒÃÃÑ¡ÉÒâäàÁÅÔÍÍÂâ´ÊÔÊ ¨Ò¡¡ÒÃÈÖ¡ÉÒ b-lactamase expression â´ÂÁÕ¡ÒÃà˹ÕèÂǹÓàª×éÍ´ÇÂÂÒ»¯ÔªÕǹÐÁҵðҹ·Õèãªã¹¡ÒÃÃÑ¡ÉÒ 2 ª¹Ô´ ¤×Í ceftazidime áÅÐ imipenem ·ÕèÃдѺ¤ÇÒÁà¢Á¢¹ sub-MIC level ¤×Í 1 mg/ml áÅÐ 0.25 mg/ml µÒÁÅӴѺ ¾ºÇÒÁÕàª×éÍÃÍÂÅÐ 37 (6 ¨Ò¡ 16 äÍâ«àŵ) ·ÕèÁÕ¤Ò specific activity ¢Í§à͹ä«Á b-lactamase à¾ÔèÁÊÙ§¢Öé¹ 2-3 à·Ò àÁ×èͶ١à˹ÕèÂǹӴÇ imipenem áµäÁ¾º¡ÒÃà»ÅÕè¹á»Å§àÁ×èͶ١à˹ÕèÂǹӴÇ ceftazidime «Öè§áµ¡µÒ§¨Ò¡àª×éÍ Burkholderia thailandensis ·ÕèÁÕ¤Ò specific activity ¢Í§à͹ä«Á b-lactamase à¾ÔèÁÊÙ§¢Öé¹ 3 à·Ò àÁ×èͶ١à˹ÕèÂǹӴÇÂÂÒ»¯ÔªÕǹзÑé§Êͧª¹Ô´ ÊÔ觷Õè¹Òʹ㨠¤×Í ¾ºàª×éÍ B. pseudomallei ·Õèá¡䴨ҡ¼Ù»Ç¤¹à´ÕÂǡѹÁÕ¡ÒÃáÊ´§ÍÍ¡¢Í§à͹ä«Á b-lactamase ·Ñé§áºº inducible áÅÐ non-inducible ¼Å¡ÒÃÈÖ¡ÉÒáÊ´§ãËàË繶֧¤ÇÒÁᵡµÒ§¢Í§¡ÒäǺ¤ØÁ¡ÒÃÊÃÒ§à͹ä«Á b-lactamase ¢Í§àª×éÍ B. pseudomallei áÅÐ B. thailandensis ÃÇÁ·Ñ駤ÇÒÁᵡµÒ§ÃÐËÇÒ§áµÅÐäÍâ«àŵ¢Í§àª×éÍ B. pseudomallei àͧ «Öè§ÁÕ¤ÇÒÁÊÓ¤Ñ-µÍ ¡ÒÃÈÖ¡ÉÒ¶Ö§¡Åä¡¡ÒäǺ¤ØÁ¡ÒÃÊÃÒ§à͹ä«Á b-lactamase ¢Í§àª×éÍ B. pseudomallei µÍä» ¤ÓÊÓ¤Ñ-: àª×éÍ Burkholderia pseudomallei ; ¾ÑÅÊ¿Å´à¨ÅÍÔàÅç¡âµÃâ¿àëÔÊ; à͹ä«ÁີÒáŤá·ÁàÁÊ; ¡ÒõԴàª×éÍÃÇÁ¡Ñ¹ ¨Ò¡ËÅÒÂÊÒ¾ѹ¸Ø Abstract Melioidosis is a severe infection caused by the Gram-negative bacillus, Burkholderia pseudomallei, an environmental saprophyte commonly found in Southeast Asia and Northern Australia. Here, we study the diversity of 16 clinical isolates from 8 melioidosis patients who were treated at Srinagarind Hospital in Konkaen, Northeast Thailand. Pulsed-field gel electrophoresis was performed on all isolates followed by antimicrobial susceptibility testings (disk susceptiblility test and MIC) and b-lactamase expression. Multiple infections were detected in 2 patients. Most of the isolates are resistant to cefepime. However, all isolates remained susceptible to ceftazidime and imipenem, which are the antibiotics of choice for the treatment of severe melioidosis. Induction study was performed with ceftazidime and imipenem as inducers at sub-MIC level (1 mg/ml ceftazidime and 0.25 mg/ml imipenem). Overall, specific activity of b-lactamase in 6 of 16 isolates (37%) was increased by 2-3 folds by imipenem induction but remained unchanged after ceftazidime induction. In contrast, b-lactamase activity of Burkholderia thailandensis was increased by 3 folds following induction with

ˇˆ ˙* 0>2?72@2&% ! ˜ AB* ˛˛˚˛˜ ! #$ %7;z ˛˛˚ !&’ !˛()*7 + ˛,#$ !-., *˛#’ %! · 2009. 6. 23. · ˘ˇ ˆ ˘ˇˆ ˙ ˆˇ˝˛ˆ ˚˜ ! " ˘ˇ#$ %&’ ()*+, - ./*0*+

  • Upload
    others

  • View
    0

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: ˇˆ ˙* 0>2?72@2&% ! ˜ AB* ˛˛˚˛˜ ! #$ %7;z ˛˛˚ !&’ !˛()*7 + ˛,#$ !-., *˛#’ %! · 2009. 6. 23. · ˘ˇ ˆ ˘ˇˆ ˙ ˆˇ˝˛ˆ ˚˜ ! " ˘ˇ#$ %&’ ()*+, - ./*0*+

���������������� � �������� ������ ������� �4���;�� � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � � ��4�

"����<�<=��������� ���������*�0>2?72@2&%!����AB�*������������ ��������

�������� !"� #�$%7;z������!���&'!��()*7�� +����,#�$!-�.,*�#'��%!�S;-

$',,%4%)?%&*')*�0>2?72@2&%*C)35?7'+)*2@+)(*����������� ��������/�����0�1�/12�3���4��7;z5�/���1���617810��37���4�9�0����41�:��;0�7��������1�S;-

������������T�����W��Y� ���������������� ������W"���������������������� �!���"�#��$���%&'''������������T���������W"��� ������������c��W�������� �!���c��W����{'''P��[�����$��������$` � ����W"��� ������������c��W�������� �!���c��W����{'''P�<1:732=152�4>�o,-34S,404H*�75F�(737+,2404H*;�?7-902*�4>�o1F,-70�@-,15-1;�A731+975�B5,C13+,2*;�(),2+75904D�%&''';�E)7,075F�S<1:732=152�4>�o,-34S,404H*;�?7-902*�4>�o1F,-,51;�N)45�N715�B5,C13+,2*;�N)45�N715�{'''P;�E)7,075F��o10,4,F4+,+�61+173-)�G15213;�?7-902*�4>�o1F,-,51;�N)45�N715�B5,C13+,2*;�N)45�N715�{'''P;�E)7,075F��G4331+:45F,5H�792)43��/.=7,0�7FF31++I�:,S70:7DF11|:)K)42=7,0�-4=�L(��(,S70:7DF11O61-1,C1F�l'�M:3,0�P''QR�7--1:21F�p}�A4C1=S13�P''QE)1� 31+902+� 4>� 2),+� :7:13�J131�:31+1521F� ,5�:732� 72�E)1�E),3F�A731+975�B5,C13+,2*�61+173-)�G45>1315-1;�(),2+75904D;�E)7,075FF93,5H�Pm.P}�@1:21=S13�P''Q

���������� U�������������� ����������� �Y]��� U�WX��T��T �����c�!$��������$` � �T\"X���a�����T��������xT!a�b

$`�x"��Y�����^�� W����!������ �c�!Y������� �����T� �������h�#������������c�!�� U�� ��� �����������V���� p%� ^�$_���� W�^ b̀���gb[Y~��V���� m� ��a�$�!"�X����T��������� �!��`c��W��� b̀�������� :90+1F� >,10F� H10101-234:)431+,+� L(?8/O�"X����T�����������c�!��#����!"�i�����c�!�� U��T\W�^`b���gb[Y~�� W���T�����`�� U�WXX�=902,:01,5>1-2,45�a�gb[Y~��V����P������ \��` �X����^�����Y���T���c�!�� U�`b���iT�F,+D�F,>>9+,45�21+2�W���okG�"X����� U� ���a�Z�̀ U�����-1>1:,=1� W��!�!^������ -1>27t,F,=1� W��� ,=,:151=� _h\!�Y]�� V��Xa�ba������#�$��������$` � � �������h�#���.07-27=7+11�:31++,45�$`�T������T\��V�� U�`b��Y���T�����������T\a�ba������#��P����̀ �� ��-1>27t,F,=1�W���,=,:151=��T\��`X�����cb�cb�+9S.okG�01C10�� ��p��Hw=0�W���'�P&��Hw=0�����V ̀X�"X����T�� U��b����lQ�L%�����p%�̂ �$_���O��T\�T����+:1-,>,-�7-2,C,2*�c�!���^_���.07-27=7+1��"�\� [!chU��P.l�������� \�q[����T\��V`b��,=,:151=�W��̂ ��"X����Y�T\�WY�!�� \�q[����T\��V`b��-1>27t,F,=1��_h\!W�����!����� U����������������������������T\�T����+:1-,>,-�7-2,C,2*�c�!���^_����.07-27=7+1��"�\� [!chU��l�������� \�q[����T\��V`b��Y���T����U! �!���̀ �\!�T\��� �a�� � �� "X�� U�� ��� ����������� �T\W�^`b���gb[Y~����`T����T���W `!���c�!���^_����.07-27=7+1� �U!WXX,5F9-,S01� W��� 545.,5F9-,S01� g�����h�#�W `!a�b����qh!����W�����!c�!�����X������ �b�!���^_����.07-27=7+1� c�!�� U���� ����������� W������ ������������� ����U!����W�����!������!W����^�$_���c�!�� U����� ����������� ��!� _h\!�T���� V�Z�������h�#�qh!��^������X������ �b�!���^_����.07-27=7+1�c�!�� U�������������������^Y����I� �� U�������������� ����������R� "� ���� �̀���������$��$���_� R� ���^_���X�b�W��W���� R� �����`�� U������������� �"�i��

��������

7���"���� �� �� ������� �'�%���� %����"� & � ���� F��#���$����� &�%����5� ����������

������ �����5� ��� ������#������ ������� ��� %�##��� � '���"� �� +���������)��� ��"����������)�������*

9���5� �� ���" � ���� "����� � �'� �8� %��%��� �������� '��#� 4�#���"���� �������� ��� ���� ������"

��� +���$���"�9������� ��E��!���5�����������������"*� 0����"�'��"� $��� ���%����������� ��� ���'��#�"

��� ���� �������� '���� �"� & � ���#%��&��� ���%���&�� � �����$�� �"�!� ���%���&��� � ����� ��"�712�

��"�����%��#���� �.�������*�7������� �'�%����� ���� "���%��"� �� �� �������*�7���� �'� ���� ����������� ��������� ��� %�'��#�*� 9� ����5� ���� �������� ��#���"� ���%���&��� ��� %�'��,"#�� ��"� #����#5

�%�� ���� ���� ���&��%�� �'� %��%�� '��� ���� �����#���� �'� ������� #���"���*� 1�"�%���� ���" � ��

���'��#�"� ��� %�'��,"#�� ��"� #����#� ��� �"�%���� ��� ��&�712� ������ ��� �$>#�� %�'��,"#���"��*����$>#��#����#�*�(������5����%'%��%��� ��'�����%��#������8��'��8������������:�� ����%�����"�& ���� '��"�� & � #����#� �"�%���� &��� ��#���"� ��%���$�"� �'���� %�'��,"#�� �"�%���*� 1�� %�������5

����%��#���� �%��� � �'������������ �������������� ��� �%�����"� & � �� '��"�� '���� �$� �"�%���� ��

Page 2: ˇˆ ˙* 0>2?72@2&% ! ˜ AB* ˛˛˚˛˜ ! #$ %7;z ˛˛˚ !&’ !˛()*7 + ˛,#$ !-., *˛#’ %! · 2009. 6. 23. · ˘ˇ ˆ ˘ˇˆ ˙ ˆˇ˝˛ˆ ˚˜ ! " ˘ˇ#$ %&’ ()*+, - ./*0*+

�44������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������ ��������������������

������%�'��,"#����� #����#*� 1��������$� 5� ���� �������� '��#� ���� ��#��������� ��� �"�����������%��#����"�%&��� ��� �����"�%&��� ������ ���*� ������ �������� ��$$����"� ����� ����%��#���� �.�������� ���� ������ ������ �� "''������ '��#� ����� ����� ����������������"������� '��#� ������� ��� ������*����� '�"�$

���� #�������� #��%������ '��� ���� ��$�������#�%����#��'�����%��#���� �.�������� ����� ������ �����*

���� �������������� ������ ������� 0����"� '��"� $��� ���%������������ ��6�%��#�����7������� �'�%���

����

�).="%%�$&������ '���������% �����).="���������������� ���'����@��+*�����!���#���+#�����=�,"������?!��e��*"�).=�%%>+��p@�������?�e��"�)��&���""��p���!&*%������&"����.","������?""��&���������������?�����������@��).="�+*����(�-��,"������?>+��p@��@.=�����������f&�%/SO:9:_1C%U%{627;5l5C:5DEFFX<%�).="%%(�'���������%��������&(,"�>�����#""�>+�#�%!������?���@� * �������!�-��&���""��p������."���-�����.">+��p@��!��+ ��% >+�"����,"�>�����#""�>+�#�@��+*�(�����,"��'�����% �����"������+�,"�>���+*����� ����&=��&'�����.="������p���@��% �����?��f�>+��#I������f�����@�I(����/M6C831C:9% 78264WJ527<% ��������% 7826M53% M:39698;49534562% 052789J9524527% +*���#I�% J1C;8Py058CP78C% 8C83496JO698;5;% /aTZ|<% �@.�"?��f����������������������@�I�����#�A�����,"��).="%%(� '���������/�662J:8K%84% :C`D%\ccc<%��."!)*!����&#+&������#�I#-�@,"����x#)����!������f�>��% �).="%%(�'����������+�����).="���������+.="&'"���x#)����>+�I���)�&#% /524952;53:CCW% 98;5;4:238<% ��@��% :MJ535CC52% ���% 380196L5M8>+������*���"�����%�yC:34:M:;8% ���������������e!�����'"��������x#)����!���'(�% 38JO:C6;J6952;�)'�% 38JO:C64O52% ���% 380196L5M8% �+*% /�5l89M698% 84% :C`D% EFXG<% ��������@��'�% �������@�I�(,"��"������yC:34:M:;8% �������������!�����&(���,"����+.="&'"��!�����'�������f�>�����#""�>+�#�+*�����x#)�����&'����'�����?��f�e����f�����@�I(����,"��).="���@�I�(+���'��% /Z6P098W% 84% :C`D% EFFEQ% R95[1PPO:9:484% :C`D% \ccH<% �"������=������?��f�@��'�% �).="% %(� '���������% ��������e��*���"������+*����!�*�).="���(����&#���+.="��� �,�=�% >+��p@��% 3804:^5P5M8% ������������&�g��!������f� * ����>�����#""�>+�#�/~51M;1J% U%�14O85_:212D% \cc\<% ����e*�����).="�����e��*���"������+*���,�=�% ��."% ����������������,"��"�����"���'� �!�*�����f� * �����������+*���% ���"&���������)��#&���>��+���'�����#��� �,�=�

�).="%%�$&������ �&����������% �����).="�������f�����@�I(����!��*�������%%(� '���������% ����&�&'�����@����(����&#���!)*�=�&��% >+��).="%%(� �&����������� �����e!)*�=�&��% �y:9:[526;8% �+*% �&'�).="%(�'������������'�����e!)*�=�&��%�y:9:[526;8%�+*%������������&�&'��!�����'"!�*��#+>��%%�."%%(��&����������@����!�+#�% ��������������e!�����'">��&��% �&'%%(� '���������% @��+*�=����"�' !�+#��������+*��� * ������������������e!�����'">��� �%/hO827%U%h19958D%\ccY<

!����?��f���=���=% ���&e(��������@.�"?��f�e�����������������+*��@�I(����,"��).="+*���#I�% aTZ|����=�?��f������&�&'����,"��"�����%�yC:34:M:;8% �����*��,�=�����).="%%(� '�����������������+*��� * ����!�>��@�����?�����#����% ����+,"���'�% �@.�"�'(���*��' ���?��f������������(������*���"�����%�yC:34:M:;8,"��).="� %(� '���������� &'"��% >+��p@��!������?������������?��f����������"���������).="�*"�����=����������������?��������@����&#+�).="���%%(�'���������%�������(+!�>��%/�@�#������D%%\YtG<%+��=�%���?��f�e���(����&#�����*���"�����,"��).="��������#�����% ,*"� �����+*������?��f���)'��!�*�����e"I#���e�����+.="��,"�&��).="% �������,*"� �@.=�g��!�����w"��������#+���+.="���+*&'"��

������ ��� ���������

��'(�&�"�'�����!)*!�����#���).="%%(�'����������Ed%�">���&%��������+*��� * ���������%X%���!�>��@�����?�����#����

Page 3: ˇˆ ˙* 0>2?72@2&% ! ˜ AB* ˛˛˚˛˜ ! #$ %7;z ˛˛˚ !&’ !˛()*7 + ˛,#$ !-., *˛#’ %! · 2009. 6. 23. · ˘ˇ ˆ ˘ˇˆ ˙ ˆˇ˝˛ˆ ˚˜ ! " ˘ˇ#$ %&’ ()*+, - ./*0*+
Page 4: ˇˆ ˙* 0>2?72@2&% ! ˜ AB* ˛˛˚˛˜ ! #$ %7;z ˛˛˚ !&’ !˛()*7 + ˛,#$ !-., *˛#’ %! · 2009. 6. 23. · ˘ˇ ˆ ˘ˇˆ ˙ ˆˇ˝˛ˆ ˚˜ ! " ˘ˇ#$ %&’ ()*+, - ./*0*+
Page 5: ˇˆ ˙* 0>2?72@2&% ! ˜ AB* ˛˛˚˛˜ ! #$ %7;z ˛˛˚ !&’ !˛()*7 + ˛,#$ !-., *˛#’ %! · 2009. 6. 23. · ˘ˇ ˆ ˘ˇˆ ˙ ˆˇ˝˛ˆ ˚˜ ! " ˘ˇ#$ %&’ ()*+, - ./*0*+

��������������� ��������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

������� �� ����� ������ ����������� ��������� � ������������������ !"���#$�%&'� ���()� *+�,��-� ������������ ����� � ��./��*�0�*+��123

�������������� ��������������������������� !"�� ##$! %&� '(!'�)*��+,-.�����/�0�1������ ������ ��� ��������� � �������������� 23� ����� ��4�/5����6�������

78(9:�;%&(�/�4��������)*<��5������1�/��1�61���=���� �->?,�@3AABC�D*�������������0���EFG��6������������)��*�����E�*<���� �6�� H1���� ��������������� 9IJ 7 88 &� )*�� 7(#%K ' &� )��������������������������I(:%J(&(I�)*�� J(:97 8 &L'9;%M97'9I�@��<)0� �<�N*C�0�����E��*�O�7(JP98%!J%: &���O�/�4�Q��<)���7(#%'9K I(R7(#'9; � I(� )*�� 7(#': 9K%&(� H1���� �����1� 0��H6��SO������� @!$!7(J' M8(C� F���������61�*� � @ &'(:I(� 9'(C���.������ �����1� 0��H6��SO���������� 7(#(J I(� )���6 � ����������� 7(#'9; � I(� )*�� I J(&(I� @���� /�4� 2C)*�D*������������+,-��� ����������H1���������/�4�5�/�0�10���EFG����NE����61�����������@!$!7(J' M8(CF������������61�*� � @ &'(:I(� 9'(C� ����� 7(#%'9K I(R� 9;':(%&9IR� I(:%J(&(I� )*�� 7 J:%#8%K97 &� ��T��<�@��<)0� �<�N*C� �����/O�0��H6��SO���������� 7(JP98%'P &� @+,-� U� V3BW��XYI8CR� 9IJ 7 88 &� @+,-� U� WZR23[��XYI8C� )*�� %K97 88 &� @+,-� U� WZR� 23[��XYI8C� ���.�����������6 ���������� 7(#(J I(� @+,-� U� 2WRQ3���XYI8C�\�4 ��T��7(JP98%!J%: &���O�/�4�Z�����<���)0� ���*�������6���/�405�6G�6 ���� /�4�2

��������� �������������� ���.�������������0���]E����0�<� ���\S��^897'9I9!(� �� �����/6� � 2W� ��\�*�� .����������

�<���������0*���� � & ':%7(# &� \�4 ��T�0610����/�4E�</64��� )*��<N.6��6��������T�0610������ ���\S��^897'9I9!(E�����������6� ����*�������������0� ����E�����F��4���5�@ &�$7(C����0�<� ���\S��^897'9I9!(����� I J(&(I\�4 ��T�����������/�4��T�/�4/��1�������T�0���F��4���5�@ &�$7(:C�/�4��������0�<� ���\S��^897'9I9!(�)*��7(#'9; � I(

������

���

����

� � � � � � � � � � � �� � � � � � � � � � � �� � � � � � � � � � � �� � � � � � � � � � � �� � � � � � � � � � � �� � � � � � � � � � � �� � � � � � � � � � � �� � � � � � � � � � � �� � � � � � � � � � � �� � � � � � � � � � � �� � �

Page 6: ˇˆ ˙* 0>2?72@2&% ! ˜ AB* ˛˛˚˛˜ ! #$ %7;z ˛˛˚ !&’ !˛()*7 + ˛,#$ !-., *˛#’ %! · 2009. 6. 23. · ˘ˇ ˆ ˘ˇˆ ˙ ˆˇ˝˛ˆ ˚˜ ! " ˘ˇ#$ %&’ ()*+, - ./*0*+

�;������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������� ��������������������

�����������x#)�������!)*�������f�>��������&#+�).="+���'��% @��'�% �).="�=���+��������+�"������������e!�����'"�% 2549638052% >+�@��'�% ���).="�����% d% �">���&�����.�"e ����������% +*��% 5M5J828M% ��*����'�% ;J835053:345l54W% � �,�=�% \yH% ��'�% �."% h���HD% h���tD% h���XD% h���EHD% h���EG% ���%h���EX% /&�������% \<�&'��'@���������������,"��'�% ;J835053% :345l54W% ��.�"�).="e ����������+*��% 3804:^5P5M8% &����,*�����).="%(� �&����������%������'�% ;J835053% :345l54W%� �,�=���."�%H% ��'���.�"e ����������+*�����=��"�)�#+

!�!"����������+:1-,>,-�7-2,C,2*�c�! �� �̀ ��Xc�!���^_������5,234-1>,5

��� ������ �����

����#�% J1C;8P% 058CP% 78C% 8C83496JO698;5;% /aTZ|<% �����#I����e �!)*"�'����*��,���% ��������#I���&�g��!����?��f���f�����@�I(����,"��).="% ������?��f���=���=��+�!�*��$��'�% �).="%%(� '���������% ���@�!� * ����>�����#""�>+�#��=�%X%�����=�����������������@�I(����%���%@��'�!�������� * ����������������&#+�).="�'��������).="�������@�I�(% /M1C45JC8% 520834562<% !�����">���&��� ����,"��e�+��"$��"���."����&'��������,*������% ��f��&'��q% +���'�������e!)*����&��'�)�=e��������������,"����@�I�(,"��).="%%(� '������������@�!��e�����+,"���'���."��#���!��*�����%��.�"?��f�e��������,"��).="&'"���x#)����+*���#I�%P5;_%P5001;562%48;4������'������,*�,*�,"������&������(+��������e���=�������#,"��).="�+*% /V]h<% @��'�% �).="��������+�"�����"�' !���+���&'"��%���k��."%��&'"����+��������%�).="�'��!�'+.="&'"��%3808J5M8%�����+����%38JO:C6;J6952�'(����% t% "�'�����$+��v��(��@��'�% ��"(�&#��������+.="&'"����'(�%�yC:34:M% ,"��).="����������@#��� �,�=�% ���������

��R�����*/.-)J)-�;-0)F)03��8�5�Sz��TU������������ */.-)J)-� ;-0)F)03� ��� � V�R"�������%�U�W���� 8)09?-.J)8� �X��� ���Y!%�#Z%� [�R �� S� ����E80)1)?0)-� ;119.F);0)?8*�� BEGH� -.0;I)():.6� 7QAH� ):)/.8.:

Page 7: ˇˆ ˙* 0>2?72@2&% ! ˜ AB* ˛˛˚˛˜ ! #$ %7;z ˛˛˚ !&’ !˛()*7 + ˛,#$ !-., *˛#’ %! · 2009. 6. 23. · ˘ˇ ˆ ˘ˇˆ ˙ ˆˇ˝˛ˆ ˚˜ ! " ˘ˇ#$ %&’ ()*+, - ./*0*+

��������������� ��������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������������

����������� �������� �� ������������������������ ������������ ��!"#$%#&#'(��� ����)��*�������������+,-����.��������/������������������-��������/.����0/1� )� 2��� ������3� ������������ ��������02��� ����3��/� ��4 5��������������)��0����+,-����.���0��0� ���� 5�*����)-���*��-��6���-���+7��89:;$(<�0� ������������ ��!"#$%#&#'(�=����>?��*���0� ������������ ��������� /� ��4 5�=����� ������3 ��*�)������������������1���������� �!"#$%#&#'(����������������).�@A�BC�/� �DC���*�)�E����������'F($8G8$�#$%8H8%I��������� ��!"#$%#&#'(��=-���>����6!@� ����� B89:;$8J"(E� �����1> �2������������ 8&8F(9(&� ���+7�� 89:;$(<� ��2��� ������������ � ��!"#$%#&#'(�����?).��>/� ����� ���������?�����=���*�)�0���������� 'F($8G8$�#$%8H8%I��������� ��!"#$%#&#'(� �=-���>���������1> �2������������ $(G%#K8:8&(� B9L9!89:;$8J"(E� ��1������+7�M)��� ������/� � $(G%#K8:8&(� �+7���+,-����.���1> 0���+7�����N����2����� 5�*����)-���*��-�� BOP8%(� (%� #"QR� DSTSE� 2� �����0��0� ���� 5���M)��02���������������� �� ������� ��� U��/ ��02�� -�+V�2������0������� �-����������0/� ���� 0�M�>+W������� ���-������?��&;"%8F"(� 89G($%8L9� ����� =����� ������������ ��!"#$%#&#'(� ��������������?��� 89:;$8J"(� ?).� 9L9!89:;$8J"(?)./� M)���� �!"#$%#&#'(� (XF<(''8L9� �������� �+��������� ��� ����������� ��������11> �2����������/� ��+,-����.���������-���/��+7� ��?���02��2U�1�����?� ����0� �������2������������� ������������ �!"#$%#&#'(� ����� /� /.���������� ����������?��).��*�)�Y��0����=��Z 3���?)��� ���=�����?� ��������.2�������=��Z 3 �������� ��� ����������� ��/������+7�����������)� 5[.���=��Z3 ���0 )������ ���������� ����������� �� ����3��� ����� M)/� ��4 5���������� /����+��> ��4 5�0����� ������3� ������������ ������������ ���������������+

������������

/� M) ��4 5�� ?���02��2U�1�����2)� 2)�����)� 5[.���=��Z3 ��������������� �������������=�0�M�>+W��*����)-���*��-���?).=������ ���-����������?���&;"%8F"(�89G($%8L9��� �����������3 ��*�)����������#&F8$8""89� ?��������������������� $(G%#K8:8&(� ?).� 8&8F(9(&� ���+7������0���� 5�*����)-���*��-� ��?����� �������� � �!"#$%#&#'(� 0�� ��� ����������� ������?� ���� ��� ������?��� 89:;$8J"(?).�9L9!89:;$8J"(�*��1���+7�?���89:;$8J"(������/.� -���������0��� 8&8F(9(&��+7�� 89:;$(<� �����������?� ����/� ��� ����������� ���� ��?����� �������� ��!"#$%#&#'(� � ?��� 89:;$8J"(� �����0��� $(%#K8:8&(�2���� 8&8F(9(&�+7��89:;$(<

� �� ����������

����-/������������3�������3�/� ���� ��� ���3�������3� ���-/��� B� �QE� ?).4>�� �-/��*����)-���*��-��[.?=��4���� � �2��-���)�����? ��� �[.M�>�-/��������3[4>�� *����)-���*��-���������3����.2 ���������������� ����������� ��2��� ��4 5�0���������� ����3[�/��2������2���+,-���- ��Y���-��/3)����-���?).+��-��-���?).2�����-/�����2���� ��1�����-/������-���4���� �3�Y�=��2��-���)�����4�����������3����.2 �3+ �[ ������������?).�1�����0� ��4 5��)���.�.��)������ ��4 5�

����������� �

�=)-�/���� ���5N *��-4� �-\Q�B6]^AEQ����������������Q� �3���=_`�*a)-��- �=��)-��-��QbP(9cR� dQ� bQR� e� b;<<8(R� fQ� gQ� B6hh]EQ�i("8L8:L'8'`� jF8:(&8L"LcIR� F#%PLFPI'8L"LcIR� #9:�&#9#c(&(9%Q

������������� ����!"�#�$��%�R�&'R� @T@!^DCQ

Page 8: ˇˆ ˙* 0>2?72@2&% ! ˜ AB* ˛˛˚˛˜ ! #$ %7;z ˛˛˚ !&’ !˛()*7 + ˛,#$ !-., *˛#’ %! · 2009. 6. 23. · ˘ˇ ˆ ˘ˇˆ ˙ ˆˇ˝˛ˆ ˚˜ ! " ˘ˇ#$ %&’ ()*+, - ./*0*+