Liquid-Based Cytology in Non-GYN...

奇美醫院 細胞病理科

王秀珠

Liquid-Based Cytology in Non-GYN application

液基細胞學原理

• 液基抹片指的是將採取的檢體，置入細胞保存液内，再經過處理去除影響診斷的背景(黏液、血液及發炎性滲出物等)，將細胞集中，製作成薄層抹片，經固定、染色、閱片後，最後由病理醫師做出細胞學診斷;這樣的製作方法不但可以改善細胞學的判讀品質，而且剩餘檢體也可以進一步做免疫染色或分子病理檢驗。

3

檢體類別

Advantages in LBC

• Entire sample transfer • Reproducibility • Small screening area • Cell preservation • Cell concentration • Devoid obscuring factor • Ancillary tests

Disadvantage of LBC

• Higher cost • Facility demanding • Alteration in architecture • Alteration in cell morphology • Cannot perform air-dried smears for Romanowsky stains (Liu、Diff-Quik、

Wright-Giemsa stain )

• 1996，Cytec Thinprep 2004，LGM Liqui- Prep

• 1999，TRIPATH,AutoCyte 2011，Biodyne, CellPrep

(SurePath) US FDA approval: None

Technical Differences 過濾膜

(ThinPrep， CellPrep)

離心+自然沉降

(SurePath)

Cibas ES, Cytology Diagnostic Principles and Clinical Correlates, 4th ed, p5

Comparison of Different LBC Methods 名稱 Cytospin

(傳統細胞離心)

ThinPrep

(新柏式)

SurePath

(BD必帝)

Liqui-Prep

(麗柏)

CellPrep

(弘晉)

原理 離心 過濾膜技術 離心+自然沉降 離心 過濾膜技術 所需設備 一般離心機

細胞離心機 特殊製片機 自動化或手工：

標本轉移機 離心機 製片染色機

一般離心機 震盪機

特殊製片機

檢驗試劑 無 四種固定液 兩種固定液 採檢試劑套組 四種固定液

製片過程 利用離心旋轉原理將細胞打製玻片上

利用濾膜壓片製作抹片

重力自然沉降使細胞黏附在玻片上

手工塗抹 利用濾膜壓片製作抹片，增加吹附步驟使細胞分佈均勻

檢體直徑

5mm

20mm 13 mm 不一定 20mm

抹片 Somewhere between

薄層monolayer

立體 3D

薄層monolayer

薄層monolayer

科內執行

出發總要有個方向 …

• 各研討會與文獻

• 提升抹片品質

• 增加科部營收

Fine-needle aspiration (FNA)

• Thyroid FNA Adequacy(2009 TBS of Thyroid): 6 groups of follicular cells Nondiagnostic rate: 2 ~20% CMH : 約23%

健保點值

細胞學檢查Cytology Examination (15001-15022)

執行面克服

• 臨床科：至各科說明

• 組內：

作業流程調整

新增電腦開單批價畫面

人員訓練：學習操作流程

組內研討會---Cytomorphology

Thyroid • 保吉生(ThinPrep) • BD(SurePath)

Thyroid • 保吉生(ThinPrep)

Collection – Thyroid FNA

ThinPrep® 新柏氏電腦薄層抹片

1. 對病灶進行抽吸後，打入Thin Prep專屬的保存液瓶內，混和 均勻。 2. 保存液為20ml，內含有54%甲 醇，檢體瓶較大。 3. 如有血液較多的檢體需先以醋 酸做前處理。 4. 注意病人姓名標示之正確性， 並依照一般流程送檢至細胞病 理科。

ThinPrep®: Filtration method

ThinPrep 5000

•TP5000多量處理：每個托盤 20 個檢體

•每 20 個檢體處理時間約為 45分鐘。

•可用於婦科及非婦科檢體，程式不同。

•僅製片。

ThinPrep 2000 •單容器處理 •去掉瓶蓋，將檢體瓶和ThinPrep玻片放在機器裡。按下按鈕，等待 3-5 分鐘（具體時間視細胞結構而定）

•採集處理後的玻片放在95%酒精中固定 •僅製片 •可用於婦科和非婦科檢體，但是需要不同的篩檢程式。

•每小時處理 25 張片子

ThinPrep 2'30''

Thyroid • BD(SurePath)

Red

5-10% methanol Haemolytic agent Excellent for bloody specimens

BD Cytorich solution

Clear

24% ethanol solution Good general use preservative Non-bloody specimens

Collection – Thyroid FNA

Conventional / CytoRich LBC - FNA

1. 取10 mL的cytorich red固定液至空離心管中。固定液可常溫保存，成本昂貴請小心取用。1mL固定液至多可溶解50ul的血液，若檢體含血量多，請適量多加固定液。

2. 對病灶進行抽吸後，打入裝有固定液的離心管中(針頭請置於液面下)，並抽取固定液來回清洗針筒約三到五次，盡量將抽取的細胞沖出至固定液中。完成後蓋回蓋子，並上下搖晃使其混和均勻。

3. 若是抽出囊腫內液體，請打入5mL檢體至保存液中，剩餘檢體直接丟棄。

4. 至少靜置半小時以上。

5. 注意病人姓名標示之正確性，並依照一般流程送檢至細胞病理科。

FNA---採檢步驟

Processing (1) Collection Vortex 10min

Processing (2) Centrifuge for 5 minutes @ 600 g

Pour off supernatant

Add 3 -10 cc Cytorich red and vortex 20”

Over night

Centrifuge for 5 minutes @ 600 g

Pour off supernatant and vortex 20”

Processing (3) PreCoat slide put into Slide rack Settling chamber

Settling chambers insert into cutouts and lock

Processing (4) PrepStain system全自動電腦製片染片

獨特檢體架設計 –具方向性,避免檢體放置錯誤

每片玻片單獨製片染片 –專屬chamber & precoat slide

PrepStain system全自動電腦製片染片

PreCoat slide put into Slide rack

Settling chamber Settling chambers insert into cutouts and lock

Processing (4) Add 1 cc Tris-buffer & vortex to homogenise sample

Put the sample into settling chamber Stand 10 min